1、凱氏定氮法

2、凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮含量的方法。即在催化劑的存在下，樣品用濃硫酸消化，將有機(jī)氮全部轉(zhuǎn)化為無機(jī)銨鹽，然后銨鹽在堿性條件下轉(zhuǎn)化為氨，用水蒸氣蒸餾，用過量的硼酸溶液吸收，再用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定，計算出樣品中的氮含量。

3、由于蛋白質(zhì)中的氮含量相對恒定，可以由氮含量計算出蛋白質(zhì)含量，因此該方法是一種經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。

4、縮二脲法

5、縮二脲法是一種用于鑒定蛋白質(zhì)的分析方法?？s二脲試劑是一種堿性含銅試液，顏色為藍(lán)色，由1%氫氧化鉀、幾滴1%硫酸銅和酒石酸鉀鈉配制而成。

6、當(dāng)?shù)孜锖须逆I(多肽)時，試液中的銅與多肽配位，絡(luò)合物呈紫色。濃度可通過比色法分析，紫外-可見光譜中的波長為540nm。識別反應(yīng)的靈敏度為5-160毫克/毫升。鑒定反應(yīng)的蛋白質(zhì)單位為1-10毫克。

7、苯酚試劑法

8、6個試管分別貼上標(biāo)簽，前5個試管加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液，最后一個試管加入待測蛋白溶液，不加標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液，室溫放置30分鐘。第一個不含蛋白溶液的試管作為空白對照，在650nm波長處測定每個試管中溶液的吸光度值。

9、紫外線吸收法

10、大多數(shù)蛋白質(zhì)在280nm波長處有特征最大吸收，這是由于蛋白質(zhì)中存在酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸，可用于測定含量為0.1 ~ 0.5 mg/ml的蛋白質(zhì)溶液。

11、取9支試管，分別貼上標(biāo)簽。在前8個試管中加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液，第一個試管不加標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液，最后一個試管不加標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液加入待測蛋白溶液。每個試管中的液體總量是一致的，通過加入蒸餾水來補(bǔ)足。將液體混合均勻，在280nm波長下進(jìn)行比色，記錄吸光度值。

12、考馬斯亮藍(lán)法

13、考馬斯亮藍(lán)顯色法的基本原理是蛋白質(zhì)能與考馬斯亮藍(lán)G-250定量結(jié)合。當(dāng)考馬斯亮藍(lán)G-250與蛋白質(zhì)結(jié)合時，其可見光最大吸收峰從465nm變?yōu)?95nm。

14、當(dāng)考馬斯亮藍(lán)G-250過量且濃度不變時，溶液中蛋白質(zhì)的濃度不同時，不同量的考馬斯亮藍(lán)G-250會從吸收峰在465nm的形式變?yōu)槲辗逶?95nm的形式，這種變化有一定的定量關(guān)系。

15、一般來說，當(dāng)溶液中蛋白質(zhì)的濃度增加時，顯色溶液在595nm處的吸光度基本上可以線性增加，因此可以用考馬斯亮藍(lán)G-250來測定溶液中蛋白質(zhì)的含量。